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恒远产品文献:TGF-β1ELISA试剂盒在文献中的引用

点击次数:159 发布时间:2019/11/29
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高糖对大鼠腹膜间皮细胞分泌细胞因子的影响及苦参碱的干预作用
朱士彦1,甘 平2,廖 彧1,巫建芳1,龙贵华1
(1.广东省佛山市顺德区龙江医院肾内科 528318;2.贵阳医学院附属医院肾内科,贵阳 510000)


[摘要] 目的 研究高糖刺激下大鼠腹膜间皮细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)和转化生长因子β1(TGF-β1)及苦参碱的干预作用,探讨腹膜纤维化发生机制。方法 通过体外培养大鼠腹膜间皮细胞(PMCs),依据加入药物浓度分成5组:2.5%葡萄糖组(n=15,A 组);低糖苦参碱组(2.5%葡萄糖,n=15,B组);4.25%葡萄糖组(n=15,C组);高糖 苦 参 碱 组(4.25%葡萄 糖,n=15,D组);对照组(n=15,E 组,仅加不含血清的 DMEM-F12BMSC 培养 基),分别 于 第 24、48、72小时收集培养上清液,采用ELISA 法测定各组培养上清液中 TNF-α和 TGF-β1 浓度 的 变 化,同时观察各组大鼠腹膜间皮细胞光镜下的表现。结 果 光 镜下,可见 E组和 B组腹膜间皮细胞小,呈卵圆形或圆形,生长较为密集。A、C、D组腹膜间皮细胞大、呈梭形或多边形,分布较为稀疏;在 A 组,培养上清液中 TNF-α和 TGF-β1 水平较 E组无明显统计学变化(P>0.05);而在C组,培养上清液中 TNF-α和 TGFβ1 水平较 E组增加明显,差异有统计学意义(P<0.05)。在 B组和 D组中,PMCs分泌 TNF-α和 TGF-β1 水平 B组较 A 组减少差异无统计学意义(P>0.05);D组较 C组明显下降,差异有统计学意义(P<0.5)。结论 苦参碱能拮抗高糖致大鼠腹膜间皮细胞分泌 TNF-α和 TGF-β1,从而?;じ鼓ぜ淦は赴?。
[关键词] 葡萄糖;苦参碱;肿瘤坏死因子α;转化生长因子β1;腹膜间皮细胞腹膜 透 析 (peritonealdialysis,PD)由于自身生物相容 性好,中分子物质清除效率高等优点,成为目前终末期肾脏疾病的shou选透析方式。但是反复发作腹膜炎症可使有效腹膜透析面积减少,从而导致腹膜对溶质的清除及水分的超滤功能减退甚至功能衰竭,是部分 PD患者改行血液透析治疗的主要原因之一 [1]。实验表明,腹膜长期处于高渗微环境,可终破坏腹膜的整体结构性,葡萄糖及其与机体产生的炎变产物是致 PD相关性腹膜超滤衰竭重要原因之一[2-3]。如何从病理生理学机制方面深入探究腹膜超滤衰竭的发病机理,成为近年来医学研究的重要课题内容。现有研 究 证 实 人 腹 膜 间 皮 细 胞 (peritonealmesothelialcells,PMCs)具有多重重要的生理功能,如分泌、吸收、修复、支持等。在腹膜发生炎变时,PMCs自身分泌的炎性因子和细胞因子,又影响到腹膜 自 身 的 修 复[4-5]。本研 究 旨 在 探 讨 高 糖 致大鼠 PMCs分泌肿 瘤 坏 死 因 子α(TNF-α)和转 化 生 长 因 子β1(TGF-β1)及苦参碱的抗纤维化作用,为临床防治腹膜纤维化,延缓病人的生命,有着极其重要的现实意义。
1 材料与方法
1.1 材 料 选 取 健 康 BALB/c大 鼠 35 只,雌 雄 兼 用,体 重100~120g,同等条件下 饲 养,鼠 龄6~8周,由贵阳医学院动物实验中心提供。
1.2 主要试剂 胎牛血清(FCS),DMEM-F12BMSC培养基,胰蛋白酶液,卵母细胞裂解液,DAB显色剂(编号 AR1022),抗体稀释液(编号 AR1016),Hanks平衡 盐 溶 液,多 聚 赖 氨 酸,枸橼酸盐缓冲液,以上均购自郑州益康生物工程有限公司;TNF-αELISA 试 剂 盒 (上海恒远生物科技有限公司,编 号:AR2053);TGF-β1 ELISA 试剂 盒(上海恒远生物科技有限公司,编号:AR2095);即用型 SABC 免疫组化染色试剂盒(上海恒远生物科技有限公司,编号:SA1020);兔抗人细胞角蛋白18抗体、抗人波形蛋白(上海联硕生物科技有限公司);兔抗 人 第Ⅷ因子相关抗原抗体(上海联硕生物科技有限公司);2.5%、4.25%腹膜透析液2L(广州 百 特 公 司);苦参 碱 注 射 液,每 支150mg(10 mL),山西振东泰盛制药有限公司,批 号H20059335。

 

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