口服透明质酸对小鼠佐剂性关节炎的作用 陈 洁1,增田泰伸2,臼田美香2,木村守2, 徐文斌1,郑潮鹏1,洪怡蓝1,任晓静1,奚印慈1,* (1.上海海洋大学食品学院,上海 201306; 2.日本丘比株式会社,日本 东京 1500002) 摘 要:目的:探讨口服透明质酸(HA)对小鼠佐剂性关节炎(AA)的治疗作用。方法:将40只6周龄的雄性小鼠随机分成4个小组,正常组、模型组、HA组和双氯芬酸钠组。通过给模型组、HA组和双氯芬酸钠组小鼠右后足注射弗氏完全佐剂(FCA)建立佐剂性关节炎模型,经连续4周口服透明质酸进行治疗后,分别对小鼠的体质量、足跖厚度进行测量,观察小鼠膝关节肿胀程度并评分,同时采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠血清中白介素-1(IL-1)和HA的含量。结果:口服HA能显著降低小鼠足跖厚度和关节炎指数,同时血清中IL-1和HA含量亦显著降低;并且各项指标与双氯芬酸钠无显著性差异。结论:口服透明质酸能有效地缓解小鼠膝关节的肿胀,降低血清中IL-1的含量,增强活动能力,因而对小鼠佐剂性关节炎具有良好的治疗作用。 关键词:口服透明质酸;动物模型;佐剂性关节炎随着国民老龄化的急速加剧,由此导致的老年人疾病发生率逐年上升。其中,关节疾病的发生率更是与日俱增,2010年我国60岁以上老人中有约55%的人患有该疾病。我国现有关节炎患者1.2亿人以上,且数量还在不断增加[1]。目前有效治疗关节炎的主要方法包括药物治疗和手术治疗。药物治疗方面:主要有镇痛剂、非甾体类药物和糖皮质激素。然而,镇痛剂只能在短期内暂时缓解患者疼痛,无法抑制或延缓病情的发展[2];非甾体类药物和糖皮质激素虽然对关节炎具有治疗作用,但是副作用严重,使病人难以坚持长期服用[3]。手术治疗上[4],如关节清理、截骨术及人工关节置换手术,创伤大,易感染,术后并发症较多,而且关节置换术价格昂贵,并非所有患者都有经济承受能力。透明质酸(hyaluronic acid,HA)作为一种天然活性物质,以自由链形式存在于关节内,是唯yi不含硫酸基团的氨基聚糖,主要由软骨细胞和滑膜B细胞分泌,是关节滑液和软骨基质的重要成分。但人体关节内HA的含量会随着年龄的增长而流失,因而通过适当的途径补充一定量的HA成为了治疗关节炎的良好方法。20世纪60年代,Balazs等[5]首先提出了黏弹性补充提案疗法的概念。随着研究的不断深入,1974年Peyron等[6]首次将HA以针剂的形式注射进患者体内对骨关节炎进行治疗,并取得良好的疗效。近年来国内外大量临床研究也显示[7-9],关节腔内注射HA对治疗关节炎有显著效果,且既无严重副作用又安全可靠。但关节腔内注射技巧极高,且患者需忍受比较剧烈的痛楚。目前,国家卫生部已认定HA为新资源食品的一种。本研究以从HA为研究素材,通过建立佐剂性小鼠关节炎模型,研究口服HA对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)的治疗作用,旨在开发、确立一种无需忍受痛楚就可缓解变形性膝关节炎的新方法。 1 材材料与方法 料与方法 1.1 材料、试剂与仪器雄性ICR小鼠(体质量约30g,年龄为6周龄) 上海西普尔-必凯实验动物有限公司。弗氏完全佐剂(fluoride’s complete adjuvant,FCA) 美国Sigma公司;透明质酸(相对分子质量约为1×106,纯度≥95%) 日本丘比株式会社;双氯芬酸钠 广西神通药业有限公司;氯化钠 国药集团化学试剂有限公司;小鼠IL-1 ELISA试剂盒 上海恒远生物公司;小鼠HA ELISA试剂盒 和光纯药工业株式会社。YP5002电子天平 上海佑科有限公司;CT14RD高台式高速冷冻离心机 上海天美仪器有限公司;550型酶标仪 美国Bio-Rad公司;游标卡尺 杭州瑞腾精测食品有限公司。 想阅读文献全文,可点击下载或者联系我司业务员领??! |